豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞

基本屬性：

細(xì)胞名稱：豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 

組織來源：肺組織

商品貨號(hào)：LZ-YX10527

種屬來源：豬

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡介：

肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對(duì)于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動(dòng)具有重要意義。它還具有代謝功能，可以執(zhí)行一定的非呼吸功能。在肺損傷中，肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞是活性氧類的重要靶細(xì)胞之一。在肺炎的發(fā)生過程中，神經(jīng)體液介質(zhì)和氧化劑作用于內(nèi)皮細(xì)胞，使得細(xì)胞間隙滲透性增加，蛋白質(zhì)由血液進(jìn)入間質(zhì)。細(xì)胞間隙滲透性的增加導(dǎo)致低氧血癥，出現(xiàn)成人呼吸窘迫綜合征和非心源性肺水腫。

培養(yǎng)基：原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮樣，多角形細(xì)胞

傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性

消化液：0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

使用方法：

豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣，多角形細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，根據(jù)細(xì)胞特性，建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4)待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。          

3. 細(xì)胞收貨脫落

1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；

2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml完全培養(yǎng)基(補(bǔ)加1%FBS，促進(jìn)貼壁)重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)；

4)待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。

原代細(xì)胞試用的實(shí)驗(yàn)類型：

前面我們了解了原代細(xì)胞獲取和培養(yǎng)過程中應(yīng)該注意的一些細(xì)節(jié)，這有助于我們培養(yǎng)我們的原代細(xì)胞。那么原代細(xì)胞培養(yǎng)好后，它可適用哪些研究呢？上海

原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學(xué)研究等，還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應(yīng)用中幾乎都涉及了幾個(gè)常見的且基礎(chǔ)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，如下：

一、細(xì)胞增殖檢測：

豬肺微血管內(nèi)皮規(guī)格常見檢測方法：CCK8檢測法 ，MTT檢測法，Brdu檢測法，Edu檢測法，平板克隆形成

二、細(xì)胞周期檢測

常見檢測方法：流式檢測細(xì)胞周期，標(biāo)記有絲分裂百分率法

三、細(xì)胞凋亡檢測

常見檢測方法：流式檢測細(xì)胞凋亡，線粒體膜電位，活性氧檢測，Hoechst染色，電鏡，TUNEL

四、細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力檢測

豬肺微血管內(nèi)皮品牌常見檢測方法：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，Transwell實(shí)驗(yàn)，Invasion實(shí)驗(yàn)

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠環(huán)加氧酶2(PTGS2)ELISA試劑盒 ，英文名： PTGS2 ELISA Kit

人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA檢測試劑盒Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit 96T/48T

大鼠維生素D結(jié)合蛋白(DBP)試劑盒 Rat Vitamin D-binding protein,DBP ELISA Kit

英文名稱RatCytochromoP450ELISAKIT大鼠細(xì)胞色素P450規(guī)格：96T/48T

核酸氧化8-氧脫氧鳥苷(8-oxo-dG)ELISA分析試劑盒48/96次

ELISAKitSAA人血清淀粉樣蛋白A規(guī)格：48T/96T

小鼠突觸素(SYP)ELISA試劑盒 ，英文名： SYP ELISA Kit

兔血管生成素2(ANG-2)ELISA檢測試劑盒RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T

牛特異性蛋白B(PSPB)試劑盒 Bovine Pregnancy Specific Protein B,PSPB ELISA Kit

英文名稱Humaissueinhibitorofmaixmetalloproteinase-2,TIMP-2ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)規(guī)格：96T/48T

動(dòng)物甲狀腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10次

Ratprogesteronereceptor,PGRELISA試劑盒大鼠孕同受體(PGR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

MMP9重組小鼠 MMP-9 蛋白 Protein

ADM 1-52/AM 1-52 (Adrenomedullin 1-52 0.1mgADM 1-52/AM 1-52 (Adrenomedullin 1-52) 腎上腺髓質(zhì)素(1-52)

DDR2重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (aa 422-855, His & GST 標(biāo)簽) Protein

EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

BCAM Protein Rat 重組大鼠 BCAM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

豬肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞ADM 1-52/AM 1-52 (Adrenomedullin 1-52 0.1mgADM 1-52/AM 1-52 (Adrenomedullin 1-52) 腎上腺髓質(zhì)素(1-52)

EPHB1 Protein Human 重組人 EphB1 / EPHT2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

MMP9重組小鼠 MMP-9 蛋白 Protein

BCAM Protein Rat 重組大鼠 BCAM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

DDR2重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (aa 422-855, His & GST 標(biāo)簽) Protein