DNA甲基化檢測服務(wù)（BisulfitesequencingPCR，BSP）
產(chǎn)品別名 |
DNA甲基化檢測服務(wù) |
面向地區(qū) |
|
亞硫酸氫鹽測序法（Bisulfite sequencing PCR，BSP）的DNA甲基化檢測方法具有較高可靠性及度，能得出片段中每一個CpG位點的甲基化狀態(tài)。
實驗原理
用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變。針對目標區(qū)域設(shè)計BSP引物進行PCR擴增，對擴增產(chǎn)物進行測序就可以判斷哪些CpG位點發(fā)生了甲基化；一般將PCR產(chǎn)物克隆后進行測序成功率會比較高。
服務(wù)的流程
1. BSP引物設(shè)計：針對感興趣的基因區(qū)域進行BSP引物的設(shè)計
2. 亞硫酸氫鹽處理基因組DNA：提取基因組DNA并進行亞硫酸氫鹽的轉(zhuǎn)化
3. PCR擴增目的片段：BSP引物擴增感興趣的區(qū)域
4. 克隆到載體：將PCR產(chǎn)物純化后連接到載體上
5. 克隆測序：挑取陽性菌斑，提取質(zhì)粒并測序（10個克隆）
6. 序列分析：對測序的結(jié)果進行比對和甲基化分析
項目周期
15-20個工作日
項目交付
1、提供完整實驗報告
2、電泳圖譜
3、測序圖譜
4、序列比對圖譜
5、分析數(shù)據(jù)
注意事項
1、客戶提供：要調(diào)查的基因名稱、種屬，要調(diào)查的甲基化區(qū)域或位點；
2、樣品要求：細胞≥105個；組織≥100mg；全血≥0.5ml；基因組DNA ≥5ug；
3、所有樣品建議干冰寄送，保持低溫，樣品質(zhì)量；
4、每個檢測片段序列長度不超過350bp。
查看全部介紹
