兔心肌干細胞
基本屬性:
細胞名稱:兔心肌干細胞
組織來源:正常心臟組織
商品貨號:LZ-YX10317
種屬來源:兔
產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介:
心臟作為終末分化器官,然而近年來研究證實了心臟包含了可以再生的細胞,即心肌干細胞。干細胞移植作為一種治療心臟疾病的新方法收到了廣泛的關注。此外,來源于同一器官的干細胞可避免異體干細胞移植導致的排斥等風險。心肌干細胞主要分化為心肌細胞,也可分化為血管內皮細胞與平滑肌細胞。
培養(yǎng)基:原代心肌干細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形,不規(guī)則細胞
傳代特性:根據(jù)細胞特性
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
兔心肌干細胞是一種貼壁細胞,細胞形態(tài)呈梭形,不規(guī)則細胞,在技術部標準操作流程下,根據(jù)細胞特性,建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;
3)經(jīng)1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml完全培養(yǎng)基(補加1%FBS,促進貼壁)重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內;
4)待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基(37℃預熱)。
原代細胞試用的實驗類型:
兔心肌干細胞型號上海前面我們了解了原代細胞獲取和培養(yǎng)過程中應該注意的一些細節(jié),這有助于我們培養(yǎng)我們的原代細胞。那么原代細胞培養(yǎng)好后,它可適用哪些研究呢?
原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應用中幾乎都涉及了幾個常見的且基礎的細胞實驗,如下:
一、細胞增殖檢測:
常見檢測方法:CCK8檢測法 ,MTT檢測法,Brdu檢測法,Edu檢測法,平板克隆形成
二、細胞周期檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞周期,標記有絲分裂百分率法
兔心肌干細胞品牌三、細胞凋亡檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞凋亡,線粒體膜電位,活性氧檢測,Hoechst染色,電鏡,TUNEL
四、細胞轉移能力檢測
常見檢測方法:細胞劃痕實驗,Transwell實驗,Invasion實驗
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