產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品名稱:野菊花LAMP鑒定試劑盒
英文名稱:Flos chrysanthemi indici
產(chǎn)品貨號:LZ-P3139
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光。
有效期:一年
如何進行 PCR 實驗?
一、野菊花LAMP鑒定準備實驗材料(1)DNA模板:包含你想要復制的DNA區(qū)域。(2)引物:短的單鏈DNA片段,用于指導DNA合成的起始位置。(3)DNA聚合酶:一種酶,用于合成DNA。(4)四種脫氧核苷酸(dNTPs):DNA的構建塊。(5)緩沖液:提供適宜的反應環(huán)境。(6)鎂離子或其它必需的離子:通常作為DNA聚合酶的輔助因子。 二、上海設定反應混合物將所有材料混合在微量離心管中?;旌衔锏目傮w積通常在20-50微升之間。
3. PCR程序(1)將混合物放入PCR機(熱循環(huán)儀)中,并設定程序。PCR程序通常包括以下階段:(2)初次變性:加熱至94-98°C,持續(xù)幾分鐘,使DNA雙鏈解開成單鏈。(3)循環(huán)步驟(通常進行30-40次循環(huán)):(4)變性階段:加熱至94-98°C,持續(xù)20-30秒,使DNA雙鏈解開。(5)退火階段:降溫至50-65°C,持續(xù)20-40秒,允許引物與模板DNA結合。(6)延伸階段:加熱至72°C,持續(xù)1分鐘每1千個堿基,以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。(7)后延伸:在72°C下持續(xù)5-10分鐘,確保所有可用的DNA模板都被復制。(8)保持階段:將溫度降至4-15°C,直到用戶準備取出樣品。
實驗步驟:
一.樣品制備
1.PCR擴增并檢測。根據(jù)不同的引物挑選適合的退火溫度進行PCR擴增。擴增產(chǎn)物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測,上樣量3-5ul。PCR產(chǎn)物為10ng/nl左右為佳。
2.PCR產(chǎn)物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液(變性緩沖液,同《分子克隆》中的測序緩沖液),然后在緩沖液中央加入PCR擴增產(chǎn)物。按照經(jīng)驗,擴增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul,效果很好加0.5ul,如果不太好就適當增加1.5、2或3不等,同時加大上樣緩沖液的量,比如加3ul的PCR產(chǎn)物,緩沖液加到8ul變性效果更好。
3.PCR產(chǎn)物變性。加好的樣品進行離心,使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘,立即取出PCR產(chǎn)物連同架子一同置于冰上靜置5min,以免變性的產(chǎn)物復性。
PCR實驗的基本步驟:
PCR檢測試劑盒DNA聚合酶是實驗室中常用的生物學酶之一,在PCR實驗中具有重要的作用。實驗室常用的DNA聚合酶,包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一、Taq聚合酶:
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶,在分子生物學研究中得到廣泛應用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性,可以在高溫條件下保持活性,這是由于其來源于熱液生物,能夠存活和正?;顒佑诟邷丨h(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈式反應(PCR)中起到關鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈,因此在PCR中用于擴增目標DNA片段。然而,Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性,導致其生成的PCR產(chǎn)物末端容易出現(xiàn)額外的腺嘌呤堿基。因此,在某些應用中,需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、野菊花LAMP試劑盒Pfu聚合酶:
PCR法Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比,Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應中表現(xiàn)出色,其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應的可靠性和準確性。此外,Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性,可以修復并糾正PCR反應中的腺嘌呤堿基誤配,有效防止誤差累積。因此,Pfu聚合酶適用于需要高度準確的PCR擴增和DNA測序。
三、野菊花LAMP試劑盒Tth聚合酶:
PCR檢測試劑盒Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同,Tth聚合酶具有熱活性反轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶活性,可以將RNA模板合成相應的DNA鏈。因此,Tth聚合酶在逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)中得到廣泛應用,用于將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA,并通過增加熱活性酶來實現(xiàn)PCR擴增。此外,Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性,可用于修復和校正PCR產(chǎn)物的末端。
小鼠窖蛋白(CAV1)PCR檢測試劑盒 , CAV1 ELISA Kit
人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA檢測試劑盒Humanβ-lactamaseELISAKit
大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)抗體試劑盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1(AT1R)aibody ELISA Kit
英文名稱RatInhibinAELISAKit大鼠抑制素A(INHA)
待測樣品處理試劑盒20次
ELISAKitChE人乙酰膽堿酯酶規(guī)格:48T/96T
兔子生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA
Rat niic oxide (NO) ELISA Kit 大鼠血清(NO)PCR檢測試劑盒
HumanCompleme3,C3ELISAKit 人補體蛋白3(C3)PCR檢測試劑盒
Humandesmin,DesPCR檢測試劑盒人結蛋白(Des)PCR檢測試劑盒
組織MAPKAPKINASE3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit人0酸3激酶(PI3K)PCR檢測試劑盒
野菊花LAMP鑒定試劑盒CNTF ELISA Kit 大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Bax(phospho Ser184) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠等0酸化Bax抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ESRRG/Estrogen Related Receptor gamma 雌激素受體相關蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml
ACV-A (Mouse Activin A) ELISA Kit 小鼠活化素A 96T
RNF62 英文名稱: 環(huán)指蛋白62抗體 0.2ml
AU1 tag 英文名稱: AU1 tag標簽抗體 0.1ml
Anti-Bax(phospho Ser184) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠等0酸化Bax抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
陰溝腸桿菌分離瓊脂(ECIA)
3200元
產(chǎn)品名:陰溝腸桿菌分離瓊脂,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯生化管
3200元
產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯生化管,培養(yǎng)基
胰酶細胞消化液(不含EDTA)
3200元
產(chǎn)品名:胰酶細胞消化液,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯
3200元
產(chǎn)品名:乙酰胺肉湯,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎
3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆羊血,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯
3200元
產(chǎn)品名:胰酪胨大豆多粘菌素,培養(yǎng)基
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基管
3200元
產(chǎn)品名:胰酪大豆胨液體,培養(yǎng)基
胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板(TSA)
3200元
產(chǎn)品名:胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)基