牛谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)ELISA試劑盒

間接ELISA：本法主要用于檢測(cè)。（DVH）的ELISA為例，間接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液；② DVH包被抗原、酶標(biāo)抗、陰性及陽(yáng)性DVH參考；待檢鴨；③ ELISA檢測(cè)儀、加樣器、聚微量板。⑵ 步驟① 加抗原包被 → 4℃過(guò)夜，洗滌三次、拋干② 加待檢 → 37℃ 2小時(shí)，洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo) → 37℃ 2小時(shí)，洗滌三次、拋干④ 加底物液　→ 37℃ 30分鐘，加終止液⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值，并計(jì)算出P/N比值。⑶ 結(jié)果判定　已知陽(yáng)性與已知陰性的比值（P/N）≥2.1，而且已知陽(yáng)性的OD值≥0.4；在上述條件成立的情況下，如果待檢與已知陰性的比值（P/N）≥2.1，而且待檢的OD值≥0.4，則判為陽(yáng)性，否則判為陰性。

牛谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)ELISA試劑盒

免責(zé)聲明：試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作，不同批號(hào)不可交換使用，實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。

試劑盒操作步驟：

   實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做曲線(xiàn)。如樣品濃度過(guò)高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。

1.加樣：分別設(shè)空白孔、孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。 為實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的品溶液。

2.棄去，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記工作液 100μl（取1μl生物素標(biāo)記加99μl生物素標(biāo)記稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。

3.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。

4.每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同生物素標(biāo)記工作液） 100μl，37℃，60分鐘。

5.溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。

6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)可見(jiàn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

標(biāo)本的采集及保存：

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  ：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
  

  
  


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  ：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
  

  
  


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  細(xì)胞物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 (注：標(biāo)本溶血會(huì)影響**檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。)
  

  
  


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  標(biāo)本的稀釋原則：通過(guò)文獻(xiàn)檢索的了解待測(cè)樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至曲線(xiàn)的范圍內(nèi)，檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。計(jì)算濃度時(shí)，稀釋了“N”倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
  

  
  


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  品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。 如配制150 pg/ml品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
  

  
  


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  生物素標(biāo)記的稀釋原則：臨用前以生物素標(biāo)記稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記加990μl生物素標(biāo)記稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用小時(shí)內(nèi)配制。
  

  
  


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  辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋?zhuān)♂屒案鶕?jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用小時(shí)內(nèi)配置
  

  
  

ELISA：本法主要用于檢測(cè)IgM。由于IgM出現(xiàn)于感染早期，所以檢測(cè)出IgM，則可作為某種的早期診斷。ELISA根據(jù)所用標(biāo)記不同可分為標(biāo)記抗原、標(biāo)記、標(biāo)記抗ELISA等幾種，其中以標(biāo)記抗原ELISA比較有代表性，該的主要程序?yàn)椋孩?用抗u鏈（抗IgM重鏈）包被→37℃ 60分鐘后置4℃過(guò)夜，洗滌三次、拋干② 加待檢 → 37℃ 2小時(shí)，洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo)抗原 → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干④ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算：

    以物的濃度為橫坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)），OD值為縱坐標(biāo)（普通坐標(biāo)），在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出曲線(xiàn)，根據(jù)樣品的OD值由曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用物的濃度與OD值計(jì)算出曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

繪制曲線(xiàn)：在Excel工作表中，以品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出品線(xiàn)性回歸曲線(xiàn)，按曲線(xiàn)方程計(jì)算各樣本濃度值。

注意事項(xiàng)：

1.當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。

2.洗滌非常重要，不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。

3.一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，建議使用排槍加樣。

4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做曲線(xiàn)，做復(fù)孔。

5.如標(biāo)本中待測(cè)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)乘以稀釋倍數(shù)。

6.在配制品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。

7.底物請(qǐng)避光保存。

8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

試劑盒性能

1．準(zhǔn)確性：品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2．靈敏度檢測(cè)濃度小于10 pg/ml。

3．特：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

4．重復(fù)性：批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和15%。

主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA檢測(cè)試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,生化試劑

上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的生物企業(yè)。 總部位于上海，并在全國(guó)設(shè)有經(jīng)銷(xiāo)或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶(hù)為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠(chéng)信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，擁有的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及的倉(cāng)儲(chǔ)和物流系統(tǒng)。“篤瑪生物”已經(jīng)得到全國(guó)科研工作者的認(rèn)可，成為廣大經(jīng)銷(xiāo)商推崇的品牌。 公司擁有一批的研發(fā)人員，我們專(zhuān)注于生物產(chǎn)品的不斷完善和創(chuàng)新。產(chǎn)品覆蓋面廣，品質(zhì)可靠。先后開(kāi)發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí)，提供各種常規(guī)生化試劑，庫(kù)存常備產(chǎn)品多達(dá)10000多種，可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類(lèi)試劑。在質(zhì)量方面，謹(jǐn)記公司信念：質(zhì)量一切。所有研發(fā)的產(chǎn)品都設(shè)有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳a(chǎn)流程，科學(xué)的質(zhì)量檢測(cè)方法和成熟的質(zhì)量檢測(cè)程序，我們恪守對(duì)每一位用戶(hù)的承諾：用的態(tài)度做的品牌。同時(shí)，公司組建了一支的技術(shù)服務(wù)隊(duì)伍，能夠?yàn)榭蒲泄ぷ髡咛峁┑募夹g(shù)服務(wù)。每一位購(gòu)買(mǎi)篤瑪生物產(chǎn)品的用戶(hù)都能夠得到的咨詢(xún)和完善的售后服務(wù)。

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  王不留行環(huán)肽B

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• 3,4,5-三咖啡?？鼘幩?/p>

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  決明子苷B2

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  紫葳新苷II（99%）

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